靛基质试验（indole test）是微生物检验的常用生化鉴定项目。反应原理是：蛋白胨中的色氨酸被细菌产生的色氨酸酶水解，产生吲哚，在加入对二甲氨基苯甲醛试剂（靛基质试剂）后，与之作用生成醌类结构的玫瑰红色物质。

        最近有很多小伙伴咨询小编关于志贺氏菌检验中靛基质试验的问题。在GB 4789.5－2012《食品安全国家标准　食品微生物学检验　志贺氏菌检验》中，关于志贺氏菌的生化描述如下：

  其中的靛基质试验除D群宋内氏志贺氏菌为明确阴性结果外，其他志贺氏菌为多数阴性或者迟缓阳性，其中对于福氏志贺氏菌描述为迟缓阳性。

        GB 4789.5－2012《食品安全国家标准　食品微生物学检验　志贺氏菌检验》附录Ａ中，对于试验方法是这样描述的：

   靛基质试验，本来是挺简单的一个生化鉴定项目，但是大多数小伙伴都会纠结：志贺氏菌这个靛基质试验究竟该培养多久？这个必要时，是什么意思？

 《伯杰细菌鉴定手册》（第八版）中描述“福氏志贺氏菌血清型6不产生吲哚，另外一些血清型产生吲哚不稳定”。

   因此大家对于“不稳定”、“迟缓阳性”这些描述有以下疑虑：

  1、是否多数福氏志贺氏菌都是迟缓阳性？

  2、迟缓阳性需要培养多长时间会出现阳性反应？

  3、按照成品生化试剂培养时间进行培养是阳性还是阴性？

  带着这些问题，小编进行了相应的验证试验，从试验中寻找这些问题的答案。

  我们使用不同菌种保藏中心的四株福氏志贺氏菌进行试验。用平板上新鲜纯化的菌苔制备0.5麦氏单位浊度菌悬液，每支生化管接种0.2 mL菌悬液（同时接种多管平行），36 ℃培养。每天观察结果（观察结果时，滴加靛基质试剂1～2滴）。

  试验结果如下：

备注：1、“+”红色；“-”淡黄色。2、CICC10865和CMCC(B)51572为同一菌株在不同菌种保藏中心的不同编号。

         试验结果如下图所示：

36℃培养24 h                                                     36℃培养48 h

36℃培养72 h                                                 36℃培养4 d                                                  36℃培养5 d  

         为了避免试剂原因造成结果偏差，我们同时使用国内三个不同厂家的色氨酸肉汤（蛋白胨水）进行验证，四株福氏志贺氏菌的试验结果与上述结果一致。

  根据试验结果，现在我们回答最初的问题：

  1、 福氏志贺氏菌靛基质试验确实是迟缓阳性。

  2、 福氏志贺氏菌靛基质试验迟缓阳性的培养时间需要48 h及以上。

  3、 开展志贺氏菌靛基质试验，一般培养时间是18 h～24 h，不超过48 h。在这个时间范围内，福氏志贺氏菌一般都获得阴性结果。

         参考文献：

   1、 GB 4789.5－2012《食品安全国家标准　食品微生物学检验　志贺氏菌检验》

   2、 《伯杰细菌鉴定手册》（第八版）