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伪中间型葡萄球菌的生化鉴定

发布时间: 2020-11-19

葡萄球菌是引起人类感染最常见的致病菌之一,伪中间型葡萄球菌 (Staphylococcus pseudintermedius) 与金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌 (Staphylococcus epidermidis) 都属于有临床意义的葡萄球菌。伪中间型葡萄球菌是一种凝固酶阳性葡萄球菌,能够引起犬、猫等动物感染和发病,也有人感染动物源伪中间葡萄球菌的报道。


伪中间型葡萄球菌的生化鉴定


血浆凝固酶阳性!非金黄色葡萄球菌!

与金黄色葡萄球菌的区别在哪里?

请看详解!


选择性分离


在选择性分离阶段,使用Baird-Parker平板和血琼脂平板分别对金黄色葡萄球菌ATCC6538和伪中间型葡萄球菌ATCC49444进行四区划线分离,36℃培养24h。

伪中间葡萄球菌在血琼脂平板上菌落淡灰色、呈露珠状,溶血状态与溶血性葡萄球菌相似,但是溶血迟缓,有的菌株不溶血,而金葡菌落光滑湿润、菌落周围具有清晰明显的β溶血圈。在Baird-Parker平板上,伪中间葡萄球菌菌落呈黑色,菌落周围的浑浊带和透明圈不如金葡明显,在检测过程中也属于可疑葡萄球菌。

伪中间型葡萄球菌的生化鉴定


血浆凝固酶



凝固酶阳性的葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,凝固酶阳性葡萄球菌能产生一种游离血浆凝固酶,加速人或兔血浆的凝固,保护病原菌不被吞噬。

血浆凝固酶是鉴别有无致病性的重要指标,也是葡萄球菌鉴定必检的生化项目。能够产生血浆凝固酶的葡萄球菌有:金黄色葡萄球菌(S.aureus),中间葡萄球菌(S.intermedius),海豚葡萄球菌(S.delphini),伪中间型葡萄球菌(S. pseudintermedius) 等8种葡萄球菌。

以ATCC6538金黄色葡萄球菌作为阳性对照,以CMCC26069表皮葡萄球菌作为阴性对照,按照CM304冻干血浆的说明书进行操作,36℃培养,每隔0.5h观察一次,观察6h。结果ATCC6538与ATCC49444呈现凝固,CMCC26069没有凝固。


伪中间型葡萄球菌的生化鉴定

伪中间型葡萄球菌的生化鉴定


菌株的故事


根据葡萄球菌属不同种的系统发育树,中间型葡萄球菌、伪中间型葡萄球菌、海豚葡萄球菌三者之间亲缘关系非常近。自1976年中间型葡萄球菌作为一个新种被发表,近30年来一直被认为是动物的条件致病菌。2005年比利时学者根据16SrRNA序列比对和细菌生化鉴定结果,从猫、狗、鹦鹉和马中分离出了伪中间型葡萄球菌。

伪中间型葡萄球菌非常容易与中间型葡萄球菌混杂。根据Sasaki,Bannoehr在2007年的研究结果,17份被鉴定为中间型葡萄球菌的临床样本属于三个不同的种,分别为中间型葡萄球菌,伪中间型葡萄球菌和海豚葡萄球菌。其中所有来自狗,猫和人的细菌都属于伪中间型葡萄球菌。

至此,维持了30年的错误分类被纠正:中间型葡萄球菌一直被认为是动物的主要致病菌,然事实,伪中间型葡萄球菌才是真正的致病元凶。


参考文献

1. Bannoehr, J., Zakour, N., Waller, A.S.,Guardabassi, L., Thoday, K.L., van den Broek, A.H.M., Fitzgerald, J.R.,2007  Population Genetic Structure of the Staphylococcus intermedius Group: Insights into agr Diversification and the Emergence of Methicillin-Resistant Strains. J. Bacteriol. 189:8685-8692

2. Sasaki, T., K. Kikuchi, Y. Tanaka, N. Takahashi, S. Kamata, and K. Hiramatsu. 2007. Reclassification of phenotypically identified Staphylococcus intermedius strains. J. Clin. Microbiol. 45:2770–2778.

3.邱菊红,周如菊,魏光秦. 中间型葡萄球菌的鉴定方法探讨[J]. 湖北预防医学杂志,2001,12(3):33.

4.王雅丽, 李军朝, 宦晨吉,等. 5株中间型葡萄球菌的鉴定及耐药性分析[J]. 黑龙江畜牧兽医:下半月, 2016(2):100-101.

5.张宏伟,刘伟,侯丽萍,等. LAMP法检测食品中凝固酶阳性葡萄球菌[J]. 食品研究与开发,2011,32(5):126-130.

6.张欣, 姜轩, 付超,等. 耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌的分离鉴定及其生物被膜形成能力的检测[J]. 黑龙江畜牧兽医(下半月), 2019, 000(012):87-92,177.




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