用途:
用于细菌的甲基红和VP复合生化实验。
配方:(g/L)
附加试剂:
甲基红试剂和VP试剂(甲液、乙液)
原理:
多胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖类;磷酸氢二钾是缓冲剂。
甲基红(MR)试验:检验细菌发酵葡萄糖产酸的能力。某些细菌(如大肠杆菌、产气肠杆菌)在糖代谢过程中,分解葡萄糖,产生丙酮酸,丙酮酸再被分解,生成甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸等,大量酸的产生,能破坏磷酸盐缓冲体系,使培养基的pH降至4.5或更低,加入甲基红指示剂而呈现红色(阳性)。甲基红指示剂的变色范围为pH4.4(红色)~6.2(黄色)。若细菌分解葡萄糖产酸量少,或产生的酸进一步转化为其他物质(如醇、酮、醛、气体和水等),则培养基的酸度仍维持在pH6.2以上,加入甲基红试剂后呈现黄色(阴性)。
乙酰甲基甲醇生成试验(V-P试验):检验细菌利用葡萄糖产生中性的乙酰甲基甲醇(3-羟基丁醇)的能力。某些细菌(如大肠杆菌、产气肠杆菌)能分解葡萄糖产生丙酮酸,并使丙酮酸进一步脱羧生成乙酰甲基甲醇,在碱性环境中,乙酰甲基甲醇可在空气中氧化成二乙酰(丁二酮)。二乙酰再与蛋白胨中精氨酸的胍基作用,生成红色化合物。试验中加入少量含胍基的化合物(如肌酸或肌酐等)可加速该反应,使反应的颜色加深,提高反应的敏感性。
用法:
称取17.0g于1L蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,分装,121℃高压灭菌15min备用。
注意事项:
1、MR试验的正确性取决于足够的孵育时间,以便使葡萄糖代谢显示出差异,因而应掌握好培养时间,以避免出现假阴性。
2、α-萘酚具有强致癌作用,使用时避免与身体接触,避免吸入或吞食。
培养基质控: