用途:
用于细菌的动力、吲哚和脲酶复合生化实验。
配方:(g/L)
蛋白胨 | 28.0 |
磷酸二氢钾 | 1.0 |
酚红 | 0.005 |
酪胨 | 2.0 |
氯化钠 | 5.0 |
琼脂 | 4.0 |
附加试剂:
40%尿素溶液 50mL/L
Kovacs靛基质试剂
原理:
蛋白胨和酪胨提供碳氮源、维生素和生长因子;磷酸二氢钾是缓冲剂;氯化钠维持均衡的渗透压;酚红是酸碱指示剂;琼脂是凝固剂。
动力实验:检验细菌的动力,穿刺接种培养基后,如果细菌沿穿刺线扩散生长即为阳性,反之为阴性。
吲哚实验:细菌分解蛋白胨中的色氨酸,生成的吲哚可与对二甲基氨基苯甲醛结合,形成玫瑰吲哚,为红色化合物。细菌培养后,滴加靛基质试剂后,显红色的是阳性,不变色的为阴性。
脲酶实验:细菌能分解尿素的可使培养基pH升高,酚红是酸碱指示剂,pH升高后培养基整体变红,为阳性,反之为阴性。
用法:
1、称取40.0g于1L蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15min。
2、冷却至55℃,无菌加入50mL40%的尿素溶液,混匀,分装试管后备用。
注意事项:
培养基基础冷却至55℃左右,加入附加试剂,避免温度过高,附加试剂失效。
培养基质控:
观察动力试验结果:滴加2-3滴甲基红试剂,立刻观察,出现红色为阳性,不变色为阴性;
观察吲哚试验结果:滴加Kovacs靛基质试剂,10min-30min内观察结果,出现红色为阳性,不变色为阴性。如为阴性应放在36℃±1℃继续培养4h后再观察。
观察脲酶实验结果:培养基整体变玫红则为阳性,反之为阴性