用途:
用于弯曲菌的马尿酸钠水解实验。
原理:
由于细菌具有马尿酸钠水解酶,可以将马尿酸钠水解为甘氨酸与苯甲酸,甘氨酸与茚三酮反应,生成紫色化合物。
用法:
1、配制磷酸盐缓冲液(PBS)。
磷酸盐缓冲液(PBS)组分:
氯化钠 8.5g
磷酸氢二钠 8.98g
磷酸二氢钠 2.71g
蒸馏水 1000mL
2、将0.1g马尿酸溶于10mL磷酸盐缓冲液(PBS)中。过滤除菌,无菌条件下,分装成每管0.4mL。储存于-20℃。
3、挑取大量菌落于0.4mL 1%马尿酸钠管中,混匀,36℃±1℃水浴2h或36℃±1℃培养箱培养4h。观察结果时,滴加3.5%茚三酮溶液2~3滴,不要振荡,再放入36℃±1℃水浴锅中或培养箱中温育10min,观察结果。出现深紫色为阳性,不变色为阴性。
注意事项:
1、使用新鲜的菌做此实验,并且接种量要大,否则可能出现假阴性。
2、观察结果需使用茚三酮溶液,茚三酮溶液避光冷藏保存不超过7天。
3、观察结果在10~15min内,否则可能出现假阳性反应。
保存条件及效期:
2℃-8℃避光保存两年。
质控结果: