前言

最近小编注意到，有一个号称能让“微生物飞起来”的新型鉴定技术——MALDI-TOF技术，在行业内名声大噪。那么，“这究竟是一个什么样的技术呢？”下面就来跟着小编，一起揭开它神秘的面纱！

一、微生物鉴定方法体系

微生物鉴定方法多种多样。如最常使用的形态观察、 镜检、 重要的生化反应，还有准确度较高的基因鉴定法。

那么今天小编要介绍的MALDI-TOF方法，是利用对核糖体蛋白检测及与标准图库比对的一种质谱方法。

二、MALDI-TOF的原理

MALDI-TOF，全称基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）。

该方法检验原理是：

微生物中分子量在2000-20000Da范围内的核糖体蛋白质，其表达基本不受培养基、培养条件、灭活方式以及生长周期等的影响，属于保守表达的蛋白质，不同种的微生物（甚至亚种）其保守蛋白会有差异，因此每种微生物有其独特的蛋白质指纹图谱（PMF）；通过MALDI-TOF测得的微生物蛋白质指纹图谱，再与标准库里的指纹图谱进行匹配、对比，从而完成对微生物快速准确的鉴定。

图谱形成、比对及鉴定结果

三、操作流程

1、取纯化后的新鲜培养物，直接涂靶或进行提取后涂靶；2、样品点靶后，与基质混合晾干；3、将靶板进舱，确认真空度均正常和参数设置均准确后，方可开始采谱；4、获得样品蛋白质图谱后，系统将自动与标准库里的指纹图谱进行匹配、对比；5、生成最后的结果与报告。

四、MALDI-TOF的优点

这项“如此高大上”的技术，具体有什么优点呢？

五、MALDI-TOF的其他应用

除了微生物鉴定外，MALDI-TOF技术还可应用于多种领域，范围极广：

1、可疑菌溯源性分析：在检测出未知菌时，可自建菌库，保留菌株图谱信息，有助日后可疑菌的溯源分析。

2、肿瘤筛查中的运用：利用弱阳离子磁珠联合MALDI-TOF-MS分析肿瘤患者和健康对照血清蛋白质表达谱，鉴定差异表达蛋白，建立疾病诊断模型，探索该疾病的发病机制。

3、细菌耐药性分析：MALDI-TOF MS检测细菌耐药性的方法主要分为 3 类: 检测耐药菌株的特征性质谱峰、细菌酶活性作用下抗菌药物的改变和抗菌药物存在下细菌生长情况。

结语

传统的微生物鉴定技术复杂、繁琐，耗时、耗力，对技术人员的专业水平要求较高，而使用飞行质谱鉴定技术相对简便快速结果准确。相信在不久的将来，这项技术会得到越来越多的关注，应用也越来越广。