空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）是一种可以引起人类急性肠炎和食物中毒的人畜共患病原菌。该菌培养条件苛刻，生长需要特定的环境，菌株不易保存。通常在微需氧（5%氧气、85%氮气、10%二氧化碳）、42±1℃环境下，可存活4～5d，最后因培养基表面干燥而导致菌体干燥死亡。

一、空肠弯曲菌的活化方法

1.配制弯曲菌活化肉汤

a. 将各成分溶于蒸馏水中，经过0.22μm滤膜过滤除菌。FBP 根据需要量现用现配，在-70℃储存不超过3个月或-20℃储存不超过1个月。

b. 裂解脱纤维羊血提前从-70℃冰箱取出恢复至室温。

c. 称取CM125布氏肉汤并溶解灭菌，灭菌后冷却至室温。每100ml基础加入5ml裂解脱纤维羊血和0.5ml FBP溶液，分装试管，即制备完成。

2.肉汤培养

从-70℃冰箱取出弯曲菌冻存甘油管，倾倒至弯曲菌活化肉汤中。置于厌氧培养罐中，加入微需氧产气袋于42℃培养24h。

3.平板培养

取10ul肉汤培养物划线至哥伦比亚血平板（PB003A），42℃微需氧培养44±4h，观察菌落形态。典型菌落为灰色、扁平、湿润有光泽，呈沿接种线向外扩散的倾向。

4、菌株验证

通过菌落形态和生化实验对菌株进行验证，确认后进行菌株保藏。

二、空肠弯曲菌的保藏方法

1.双倍布氏肉汤甘油保存管制作：称取5.62g CM125布氏肉汤干粉，溶于70ml蒸馏水、30ml甘油中，灭菌后冷却至室温，加入5ml裂解脱纤维羊血、0.5ml FBP溶液，混匀后分装到冻存管中，每管1ml。

2. 使用接种环刮取哥伦比亚血平板上的纯菌落（尽可能多）至冻存管中，涡旋震荡5s，于-70℃长期保存。

三、注意事项