经过上期的介绍，相信大家对沙门氏菌已经有了基本了解。

从本期开始，我们进入选择分离平板。

选择分离是最考验检验员的步骤，也是干扰菌最爱逞威风的地方。

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将培养后的TTB和SC摇匀，用接种环分别划线接种于BS琼脂平板和XLD琼脂平板，或HE琼脂平板，或沙门显色平板，于36℃±1℃分别培养40h-48h或18h-24h，之后观察各个平板上菌落特征。单菌落的菌落特征最为典型，利于观察，为获得大量单菌落，一般建议采用分区划线。

    菌落特征的观察和选取对试验人员的经验要求较高，为帮助各位试验人员更好的检出沙门氏菌，我们将四种平板上常见菌落特征介绍如下：

BS琼脂是沙门氏菌检验中的必用平板，它的优势在于对伤寒沙门氏菌（S. Typhi）的检出率比传统平板高30-80%不等，特别是临床检验中。同时在沙门显色培养基出现之前，对变形菌的抑制性和特异性均好于同类培养基。所以BS琼脂一直是沙门氏菌选择分离的首选培养基。

BS琼脂的主要成分是亚硫酸铋，但是成分表中也没有此成分，这点与TTB类似。亚硫酸铋由亚硫酸钠和柠檬酸铋铵在加热过程中反应生成，亚硫酸铋和煌绿能互补的抑制大肠杆菌、变形杆菌和革兰氏阳性菌的生长，但是对伤寒、副伤寒等沙门氏菌的生长没有影响。具体可参考陆桥官网亚硫酸铋琼脂（BS琼脂）。

培养基配制时不需要高压灭菌，不宜过度加热。建议当天制备，第二天使用，超过48h会降低选择性。

国标上描写的BS琼脂上沙门氏菌菌落特征是：菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈黑色或棕色；有些菌株形成灰绿色的菌落，周围培养基不变。

其中前半段描写的是典型沙门氏菌菌落形态，后半段是非典型沙门氏菌的菌落形态。下面我们会给大家展示一些实例，帮助大家在检验中分辨沙门氏菌。

1.1.1 典型的沙门氏菌

菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈黑色或棕色。

1.1.3 非典型沙门氏菌形态的干扰菌

从上述菌落特征可以发现，伤寒沙门氏菌在BS琼脂上是典型特征，利于提高检出率。而常见干扰菌奇异变形杆菌为非典型菌落，大肠类菌受一定抑制，且特征属于非典型。这都利于排除非沙门氏菌的干扰。但BS琼脂也不是完美的，有些常见沙门氏菌也为非典型特征，需要我们挑取菌落时，优先挑取典型菌落，兼顾非典型菌落。同时还需要其他培养基（XLD、HE或沙门显色培养基）协同进行检验，避免漏检。

XLD琼脂的配方设计非常巧妙，目的是为了分离沙门氏菌和志贺氏菌。第一个巧妙之处是添加了木糖，肠道细菌几乎都可以利用木糖，只有志贺不利用。所以志贺是无色的菌落。第二个巧妙是添加了赖氨酸，沙门氏菌也能利用木糖产酸，这样就不能与其他肠道菌区分开，但是大部分沙门会产赖氨酸脱羧酶，在酸性条件下把赖氨酸脱羧后形成的尸胺是碱性，会中和木糖产的酸，从而使菌落保持无色。再配合硫化氢指示系统，沙门就变成了我们看到的形态。乳糖和蔗糖的存在可以让产生赖氨酸脱羧酶的大肠菌群大量产酸，从而与沙门氏菌区分。具体原理可以参考陆桥官网木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD琼脂）。

培养基配制时不需要高压灭菌，不宜过度加热。建议当天制备，第二天使用。

国标上描写的XLD琼脂上沙门氏菌菌落特征是：菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心。

前半段是典型沙门氏菌的菌落特征，包括了两种主要的形态。后半段是非典型沙门氏菌的菌落特征。下面还是给大家展示一些实例，帮助大家在检验中分辨沙门氏菌。

1.2.1 典型的沙门氏菌

1.2.2 典型沙门氏菌形态的干扰菌

1.2.3 非典型的沙门氏菌

1.2.4 非典型沙门氏菌形态的干扰菌

从上述菌落特征可以发现，伤寒沙门氏菌在XLD琼脂上并不是最典型的，所以体现了BS琼脂的重要性。肠炎沙门氏菌在XLD琼脂上是最典型特征，弥补了BS琼脂上漏检的可能性。但是奇异变形杆菌和志贺氏菌的干扰也会很明显。非典型的沙门氏菌菌落只有少数能发酵乳糖的亚利桑那菌才能形成，而日常检验中看到的黄色菌落更多的是大肠类的菌。一旦看到黄色菌落，也只能挑取，通过生化试验进行区分。

本期介绍了BS琼脂和XLD琼脂，下期除了HE琼脂和沙门显色外，还会带来平板的汇总，敬请期待。。。。