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沙门氏菌检验流程详解(三)

发布时间: 2021-12-17



     选择分离平板已经介绍了两个,但是情况还是很复杂,对么?莫怕莫怕,最厉害的今天出场!


今有佳人沙显氏,

一舞剑器动四方。

观者如山色沮丧,

天地为之久低昂。






1

HE琼脂


HE琼脂是中等选择性培养基,其选择性主要是三种糖,分别是乳糖、蔗糖和水杨素。沙门氏菌大部分都不利用水杨素,所以它起到和XLD琼脂中木糖类似的作用。而高含量的乳糖利于让肠道中发酵乳糖迟缓的菌产酸,方便与沙门氏菌区分。具体原理可以参考陆桥官网HE琼脂

培养基配制时不需要高压灭菌,不宜过度加热。

国标上描写的HE琼脂上沙门氏菌菌落特征是:蓝绿色或蓝色,多数菌落中心黑色或几乎全黑色;有些菌株为黄色,中心黑色或呈现全部黑色。

与XLD琼脂类似,前半段是典型沙门氏菌的菌落特征,包括了两种主要的形态。后半段是非典型沙门氏菌的菌落特征。下面还是给大家展示一些实例,帮助大家在检验中分辨沙门氏菌。




1.1

典型的沙门氏菌


蓝绿色或蓝色,多数菌落中心黑色或几乎全黑色。


沙门氏菌检验流程详解(三)沙门氏菌检验流程详解(三)
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1.2

典型沙门氏菌形态的干扰菌

沙门氏菌检验流程详解(三)沙门氏菌检验流程详解(三)




1.3

非典型的沙门氏菌

    有些菌株为黄色,中心黑色或呈现全部黑色。


沙门氏菌检验流程详解(三)




1.4

非典型沙门氏菌形态的干扰菌

沙门氏菌检验流程详解(三)


从上述菌落特征可以发现,HE琼脂与XLD琼脂的情况极为相似,这里不做赘述。


shamen 3

上述三种培养基是传统的沙门氏菌选择培养基,基本上都是基于一些生化指标来区分菌株,例如是否产硫化氢,是否利用某种糖醇。这些指标的准确性相对比较高,但是存在一些干扰菌,会形成与沙门氏菌类似的菌落形态,从而影响我们的判断。下面我来介绍一种非传统原理的培养基。



2

沙门氏菌显色培养基



沙门氏菌显色培养基是国标上的第四种培养基,是利用酶底物法,而非传统生化法,对菌进行区分的培养基。酶与底物的结合具有特异性,所以筛选的准确性更高。再把底物连上显色基团,从而使菌落着色,利于肉眼直接观察酶与底物是否结合。具体原理可以参考陆桥官网沙门氏菌显色培养基



国标上没有明确写沙门氏菌在显色培养基上的菌落特征,因为不同厂家用的酶底物和显色基团不同,最后形成的菌落特征就不同。以北京陆桥的沙门显色培养基为例。

我们还把之前用的菌株接种沙门显色培养基,具体情况如下:




2.1

 典型的沙门氏菌


      紫红色菌落


沙门氏菌检验流程详解(三)沙门氏菌检验流程详解(三)
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2.2

 典型的沙门氏菌

      蓝紫色菌落

沙门氏菌检验流程详解(三)

沙门氏菌检验流程详解(三)




2.3

 沙门氏菌

      蓝绿色菌落和无色菌落

沙门氏菌检验流程详解(三)沙门氏菌检验流程详解(三)
沙门氏菌检验流程详解(三)沙门氏菌检验流程详解(三)



shamen 3

从上述菌落特征可以发现,杂菌的干扰大大降低了。在不同传统平板上,只有鼠伤寒沙门氏菌始终是最典型的菌落特征。肠炎沙门氏菌伤寒沙门氏菌猪霍乱沙门氏菌在不同传统平板上总有呈现非最典型的情况,而在沙门显色培养基上,这三种菌都是最典型的紫红色菌落。目前,沙门显色培养基上呈紫红色菌落以外的沙门氏菌,只有发酵乳糖的亚利桑那需要特别注意,呈蓝紫色,与大肠类的菌(蓝绿色)容易混淆。传统平板上极易造成干扰的奇异变形杆菌志贺氏菌,在沙门显色培养基上呈现无色菌落,基本不造成干扰。所以无论从哪个方面,沙门显色培养基的性能都优于传统平板。


3

选择分离平板的总结


从上面四种培养基的介绍,大家可以看出:从理论上,三种传统平板上任何一种菌落形态基本都有可能是沙门氏菌,因为沙门氏菌的种类太多。沙门显色培养基性能更好,一些不典型菌落特征还能直接排除。但在实际工作中如果大家把每一种菌落形态都挑取鉴定,固然漏检风险很低,但是工作量太大。所以经过我们上述对四种培养基的剖析,大家应该明白,挑取菌落最优的方案就是优先挑取最典型的沙门氏菌菌落特征,之后是次典型的沙门氏菌菌落特征。如果既没有典型的,也没有次典型的,那么可以挑取非典型沙门氏菌菌落特征进行鉴定。

将四种培养基菌落形态分类如下:


沙门氏菌检验流程详解(三)

平板的内容就介绍这些了,希望对大家有帮助。下期将展开生化鉴定与血清的内容,敬请期待。。。。





To be continued





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