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GB4789.6-2016 致泻大肠埃希氏菌检验及注意事项

发布时间: 2022-02-23

《GB 29921-2021预包装食品中致病菌限量》于2021年11月22日实施,其中,肉制品和即食果蔬制品中致病菌指标变化较大,删除了大肠埃希氏菌O157:H7/NM,新增加了致泻大肠埃希氏菌项目,引起了广大检验同行的关注!

GB4789.6-2016 致泻大肠埃希氏菌检验及注意事项


对于没接触过这个标准的小伙伴们来说,致泻大肠埃希氏菌听起来比较陌生,那就跟随小编来一起了解下这个标准吧!


致泻大肠埃希氏菌简介


致泻大肠埃希氏菌(Diarrheogenic E. coli,DEC),是一类能引起人体以腹泻症状为主的大肠埃希氏菌,可经过污染食物引起人类发病。常见的致泻大肠埃希氏菌主要包括肠道致病性大肠埃希氏菌EPEC、肠道侵袭性大肠埃希氏菌EIEC、产肠毒素大肠埃希氏菌ETEC、产志贺毒素大肠埃希氏菌STEC(包括肠道出血性大肠埃希氏菌EHEC)和肠道集聚性大肠埃希氏菌EAEC。


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致泻大肠埃希氏菌检验程序

GB4789.6-2016


选择性增菌


样品经营养肉汤增菌后转接到肠道菌增菌肉汤中。

  注意

1、营养肉汤增菌时间为6h,时间过长会增加非目标菌的数量;


2、肠道菌增菌肉汤的培养温度为42℃,有助于抑制非肠道菌生长。


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五种致泻大肠埃希氏菌及大肠埃希氏菌在肠道菌增菌肉汤中生长情况



选择性分离



将增菌液划线接种MAC和EMB琼脂平板,于36℃ ± 1℃培养18h~24h,观察菌落特征:

在MAC琼脂平板上,分解乳糖的典型菌落为砖红色至桃红色,不分解乳糖的菌落为无色或淡粉色;

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在EMB琼脂平板上,分解乳糖的典型菌落为中心紫黑色带或不带金属光泽,不分解乳糖的菌落为无色或淡粉色。

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生化鉴定




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DBI-09 致泻大肠埃希氏菌干制生化鉴定试剂盒



五种致泻大肠埃希氏菌与大肠埃希氏菌生化反应一致,无法区分,需要通过PCR进行进一步确认。


PCR确认实验


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MX-2101 五种致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测试剂盒

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陆桥五种致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测试剂盒操作流程示意图




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五种致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测琼脂糖凝胶电泳


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五种致泻大肠埃希氏菌目标条带与型别对照表(GB4789.6-2016



根据琼脂糖凝胶电泳中样品DNA的扩增条带大小,与GB 4789.6-2016中表5(如上)进行对照,作为最终的结果进行报告。每次PCR反应使用 EPEC、EIEC、ETEC、EHEC、EAEC标准菌株作为阳性对照。




MX-2101 五种致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测试剂盒


北京陆桥的五种致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测试剂盒采用多重PCR技术,适用于五种致泻大肠埃希氏菌的体外核酸检测:

01

每个反应体系均含有大肠埃希氏菌种属鉴定和毒力基因检测的十二对特异性引物,一次反应即能鉴定五种致泻大肠埃希氏菌的型别;

02

采用国际先进的预混冻干技术,既简化了操作(两步即可上机),又能使产品可以常温或冷藏运输,且保持Taq酶较高的酶活性,极大的方便了客户的检测工作。



检验产品列表


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相关产品详情可点击以下查询:


CM142 营养肉汤(不含糖)


CM144 肠道菌增菌肉汤(EE)


CM908B 麦康凯琼脂 


CM105 伊红美蓝琼脂(EMB)


DBI-09 致泻大肠埃希氏菌干制生化鉴定试剂盒 


MX-2101 五种致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测试剂盒 




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