生物素又称维生素H、辅酶R,是水溶性维生素,也属于维生素B族,B7。它是合成维生素C的必要物质,是脂肪和蛋白质正常代谢不可或缺的物质。是一种维持人体自然生长、发育和正常人体机能健康必要的营养素。
生物素在中等强度的酸及中性溶液中可稳定数日,在碱性溶液中稳定性较差。在普通温度下相当稳定,但高温和氧化剂可使其丧失活性。
生物素检测依据的标准是GB 5009.259-2016《食品安全国家标准 食品中生物素的测定》。其中,微生物检测方法是根据植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的生长与待测试样中生物素的含量呈线性关系的原理,试样透光率与标准工作曲线进行比较, 得出待测试样中生物素的具体含量。
陆桥公司可提供符合标准的多种形式的检测试剂,包括传统的干粉型生物素测定培养基(CM1407),即用型的生物素国标即用型套装(GVT1003)以及生物素检测试剂盒(VT3103)。
不同产品在标准方法中的具体应用汇总见表1。
表1 不同产品在标准方法中的应用比对表
生物素检测试剂盒中的菌球采用先进技术,将其预包埋在冻干保护剂中,使用时将其完全溶解于培养基中,保证活性的同时也可保证实验结果的稳定性。
生物素检测产品比对
为了探求国标即用型套装和检测试剂盒两种形式的产品,对于同一样品检测结果的准确性,我们选择了标准质控样、标准样品奶粉进行了比对实验,并进行了加标回收验证实验。
国标即用型套装和检测试剂盒的标准曲线结果见图1~图2,不同质控样品比对和加标回收实验结果见表2。
图1 生物素检测试剂盒标准曲线
图2 生物素国标即用型标准曲线
表2 样品比对和加标回收实验结果汇总表
比对实验结果表明:
1)两种实验方法,生物素含量与吸光度值均呈相关度非常高的线性关系,线性相关系数R2 均在0.99以上;
2)每个梯度的平行之间误差范围在10%以内,两种产品对同一样品的检测结果标准偏差小于5%;
3)标准质控样及标准样品的测定结果均落在满意值范围内,且加标回收率均在90-110%。
因此,生物素国标即用型套装和生物素检测试剂盒两种产品均可用于样品中生物素的测定。
在生物素检测过程中,我们还有几个方面需要注意:
1、生物素容易与抗生素因子结合,且油脂会促进植物乳杆菌的生长,因此实验用到的所有玻璃器皿必需严格处理,清洗干净后再于180℃烘烤2h,从而去除残留的微量生长因子。
2、国标法样品处理时,需要NaOH调pH,回调pH值时需要使用H2SO4,不得用HCl,因为HCl能使生物素失去活性。
食品中生物素检测产品列表