最近，检测圈的一个传闻引起检测大神们的疯狂讨论—沙门氏菌在VRBA内的菌落是红色的！从原理上来说，这是不可能的！从传闻来看，又像是真实存在的！为了破解这个谜题，我们做了相关的验证试验。
首先我们要了解一下VRBA培养基的成分及沙门氏菌的生化特性。
VRBA及沙门氏菌生化原理剖析
先来看VRBA培养基的组成成分（图1）及原理：
图1 VRBA的组成成分
VRBA培养基中含有乳糖和中性红。大肠菌群可发酵乳糖产酸，引起pH值的变化，中性红作为酸碱指示剂使菌落变红；酸与胆盐结合形成胆酸盐沉淀，故菌落周围会有红色的胆酸盐沉淀环。
所以大肠菌群菌落变红是由于发酵乳糖产酸导致的！
了解了菌落变红的原理，我们再来看一下沙门氏菌的生化特性：
图2 三糖铁试验结果
从三糖铁的试验结果（图2）看，沙门氏菌不能利用乳糖，只能利用葡萄糖，而VRBA 的成分中并没有葡萄糖！从原理上分析，沙门氏菌在VRBA上不会形成红色菌落。所以传闻会是真的么？
试验验证
首先，我们采用涂布法，在VRBA表面接种沙门氏菌。结果发现，沙门氏菌在VRBA表面呈现大的无色菌落（图3）。这符合沙门氏菌的特征，沙门氏菌一般不发酵乳糖，但在有氧条件下分解蛋白胨产碱，所以在VRBA表面形成大的无色菌落。
燃鹅，我们继续采用倾注法，在VRBA内部接种沙门氏菌。结果发现，沙门氏菌在VRBA内部形成的小小菌落（图4）竟然是红色的！红色的！！红色的！！！
为此我们做了原料的排查试验，采用去掉酵母浸粉成分的VRBA，以倾注法接种沙门氏菌。结果发现，沙门氏菌在VRBA内部形成小菌落是无色的了（图5黄圈里的菌落）。
图3 肠炎沙门氏菌ATCC13076涂布接种
图4 肠炎沙门氏菌ATCC13076倾注接种
图5 肠炎沙门氏菌ATCC13076倾注接种去掉酵母粉后的VRBA
酵母浸粉含糖是正常的么？
图6 各品牌的比对试验
至此，所有的疑问都已解开。原来沙门氏菌真的会在VRBA内部形成红色菌落，但在大部分品牌VRBA上沙门氏菌菌落很小，与典型大肠菌群还是比较好区分的，且BGLB验证时很容易排除。
参考文献
1、Difco&BBL Mannal: Second Edition【M】United States of America, 2009
2、张晓桐等，酵母提取物提取工艺及应用的研究进展【J】中国调味品，2019,002（044）：160-163
陆桥官方公众号