全球每年由沙门氏菌引起的胃肠炎病例约有九千多万例，导致约20万人死亡，其中85%病例是食源性的，常居食物中毒榜首。因此，肠杆菌科的沙门氏菌是一类重要的、全球性的人畜共患的食源性致病菌，其检测在畜禽健康、人类公共安全及食品安全等方面意义重大。
随着技术的进步，沙门氏菌鉴定虽然有多种新鉴定手段，如免疫学、分子生物学、基于细胞物理/化学特征的检测技术、生物传感器等检测技术，但目前限制最少、应用最广泛的还是传统的检测技术，以形态学观察、培养特征、生理生化特征、抗原特征的鉴别为主。
传统检测技术条件简单、技术成熟、假阳性率低，但存在检测时间长，准确度受操作人经验判断和菌活性影响等缺点，而沙门氏菌属包含2个种，含6个亚种，2579个血清型，具有多种生化组合特征，其生理生化特征鉴定受人员经验判断和菌活性影响最大，这也是沙门氏菌属传统生化鉴定的一大难点。
下面我们就沙门氏菌属传统生化鉴定流程、商品化试剂盒的使用，沙门菌及常见干扰菌生化鉴定现象，常见问题来为您解析这一操作步骤。
01 沙门氏菌属传统生化鉴定 流程
为帮助大家理顺流程，我们依据GB4789.4-2016标准，将沙门氏菌属的生化鉴定判定步骤简化如下图：
流程
其中，必须用到的生化试剂有五种：
三糖铁琼脂、赖氨酸脱羧酶、靛基质、尿素、氰化钾。
可能用到的生化试剂有三种：
甘露醇、山梨醇、ONPG
测试中分离的可疑单菌落经纯化后，每个菌株测试一组，以确认该菌是否为沙门氏菌属。
02 沙门氏菌传统生化鉴定商品化试剂盒 操作
为更方便、快速地完成沙门氏菌属的系列生化鉴定并判定，我们可以选购商品化套装生化试剂盒。
下面，我们以陆桥DBI-05沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒操作视频为大家演示：
https://v.qq.com/x/page/m3202nftgzu.html
视频指路牌：
经过培养、滴加附加试剂后，按下表判断各项生化试剂结果：
然后，参照01沙门氏菌属传统生化鉴定流程部分，判断该菌是否为沙门氏菌。
03 沙门氏菌及常见干扰菌生化鉴定 结果
典型（完全符合A1组合结果）的沙门氏菌生化结果为：
其他常见沙门及干扰菌生化结果见下表：
04 沙门氏菌传统生化鉴定 常见问题
在沙门氏菌传统生化鉴定过程中，我们还可能会遇到以下常见问题：
Q1：在三糖铁实验中，菌株产硫化氢变黑覆盖了斜面底层的颜色，该如何判定底层产酸还是产碱？
A1：测试菌株产硫化氢，可判定底层产酸变黄。
为更好地观察判定，可①减少接种量（先斜面划线，再留少量菌进行穿刺，注意不要穿刺到底部）；②缩短培养时间（8h-18h）。
此外，还需要注意封膜保湿，防止斜面干缩导致结果误判。
Q2：生化鉴定使用的菌悬液浊度要求多少？
A2：生化鉴定套装为微量鉴定系统，对于菌悬液浓度有要求，使用0.5麦氏浊度进行接种，菌悬液浓度过大或者过小对实验结果的准确度有影响。
Q3：尿素酶变浅橙色，如何判定是阴性还是阳性？
A3：尿素酶黄色或橙色均判定为阴性，只有玫红色或红色才判定为阳性。
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参考文献
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